T/HBJYH 河北省金银花行业协会团体标准 T/HBJYH002-2022 金银花酚酸含量快速检测 2022-04-14发布 2022-04-14实施 河北省金银花行业协会发布 全国团体标准信息平台 T/HBJYH002-2022 前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规 则》规定的规则起草。 本文件由巨鹿县市场监督管理局提出。 本文件起草单位：北京中医药大学、河北精测科技有限公司、北京宇辰致业科技有限 公司、北京尚禾生态环境有限公司、巨鹿县科工局、巨鹿县市场监督管理局。 本文件主要起草人：李卫东、李可、耿泽宇、马威、宿颖、张玉强、代熙、鲍艺杰、 郭然、曹天丽、冉贝贝、张羽师、黄厚钰、艾飞、张军、韩熹。 全国团体标准信息平台 T/HBJYH002-2022 目录 1范围......................................................................1 2规范性引用文件............................................................1 3术语和定义................................................................1 4前期数据采集..............................................................2 5金银花酚酸含量定量校正模型的建立、验证、维护、更新、传递..................3 6校正模型的应用............................................................4 全国团体标准信息平台 T/HBJYH002-2022 1金银花酚酸含量快速检测 1范围 本文件规定了金银花中酚酸含量的快速检测方法。 本文件适用于邢台市金银花的酚酸含量快速检测过程。 本文件不适用于仲裁检验。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期 的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括 所有的修改单）适用于本文件。 《中华人民共和国药典》2020年版 GB/T29858-2013分子光谱多元校正定量分析通则 NY/T2794-2015花生仁中氨基酸含量测定近红外法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1金银花 本品为忍冬科植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或带初开的花。夏初花开放 前采收，干燥。 3.2酚酸 指一类含有酚环的有机酸，此处为金银花中绿原酸、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸和4,5-二-O- 咖啡酰的总和。《中华人民共和国药典》2020版规定金银花按干燥品计算，含绿原酸（C16H18O9） 不得少于1.5%，含酚酸类以绿原酸（C16H18O9）、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸（C25H24O12）和 4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸（C25H24O12）的总量计，不得少于3.8%。 3.3高效液相色谱法 高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品 进行分离测定的色谱方法。注入的供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离， 并进入检测器检测，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。该方法用于测定金银花 样品中酚酸的真实含量。 3.4近红外光谱分析仪 近红外光谱分析仪由光源、单色器（或干涉仪）、釆样系统、检测器、数据处理器和评 价系统等组成。釆用钨灯光源；固体漫反射样品池、光纤探头、液体透射池、积分球是常用 全国团体标准信息平台 T/HBJYH002-2022 2的釆样装置；硅、硫化铅、砷化铟、铟镓砷、汞镉碲和氘代硫酸三甘肽检测器为常用的检测 器。检测器和采样系统需根据供试品的类型选择。 4前期数据采集 4.1样品前处理 取干燥的金银花样品，去除枝、叶等杂质，粉碎，过四号筛（粒径≤250μm）。 4.2近红外光谱采集 取4.1金银花粉末，置于样品杯中，压紧，使装样厚度≥15mm，开始扫描并获得样品的 近红外吸收光谱。样品粉末温度与仪器温度保持接近一致（±2℃）；测量波长范围取在750 nm~2500nm范围内；扫描采集模式为反射或漫反射；谱图分辨率可根据实际需求选择，一 般为8cm-1~16cm-1；样品杯设置旋转；光谱扫描方式可根据实际需求设置为单次扫描、连 续扫描、平均谱图扫描等。 4.3样品中酚酸含量测定 酚酸含量测定参照《中华人民共和国药典》2020年版金银花项下检测方法，以十八烷 基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，0.1%磷酸溶液为流动相B，按表1中的规定 进行梯度洗脱；柱温不高于25℃；流速为每分钟0.7ml，检测波长为327nm。理论板数按绿 原酸峰计算应不低于10000。 表1HPLC法测定酚酸含量梯度洗脱规定 时间（分钟） 流动相A：乙腈(%) 流动相B：0.5%冰醋酸溶液(%) 0~8 14→19 86→81 8~14 19 81 14~34 19→31 81→69 34~35 31→90 69→10 35~40 90 10 取绿原酸对照品、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸对照品和4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸对照品适量， 精密称定，置棕色量瓶中，加75%甲醇制成每1mL含0.28mg、0.15mg、44μg的溶液，得 到对照品溶液。 取样品粉末（过四号筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇50mL， 称定重量，超声处理（功率500W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用75%甲醇 补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，得到供试品溶液。 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2μL，注入液相色谱仪，测定，即得。 5金银花酚酸含量定量校正模型的建立、验证、维护、更新、传递 5.1校正模型的建立 将4.2获得的金银花样品近红外吸收光谱与4.3测得的酚酸含量匹配，建立定量校正模型。 建模步骤包括光谱预处理——异常数据剔除——模型区间选择——校正模型建立。 全国团体标准信息平台