ICS 65.020.01 B 05 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3436—2019 柑橘属品种鉴定 SSR分子标记法 Identification of Citrus varieties-SSR marker method 行业标准信息服务平台 2019-09-01实施 2019-01-17发布 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T3436—2019 目 次 前言 范围· 2规范性引用文件 术语和定义 3 主要仪器设备及试剂 溶液配制 5 引物相关信息及使用· 6 参照品种及使用 8 操作程序 结果统计 9 10结果判定 附录A(规范性附录) 主要仪器设备及试剂.… 附录B(规范性附录) 溶液配制· 附录C(规范性附录) 核心引物名单及序列， 附录D(规范性附录) 核心引物相关信息 10 附录E(资料性附录) 参照品种名单， 16 行业标准信息服务平台 I NY/T3436—2019 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由农业农村部种业管理司提出。 本标准由全国植物新品种测试标准化技术委员会（SAC/TC277)归口。 本标准起草单位：农业农村部科技发展中心、湖南农业大学、西南大学。 本标准主要起草人：唐浩、李益、韩瑞玺、江东、邓超、马莹雪、李娜、邓子牛、赵艳杰。 行业标准信息服务平台 Ⅱ NY/T3436—2019 柑橘属品种鉴定 SSR分子标记法 1范围 本标准规定了利用简单重复序列（Simplesequencerepeat，SSR）标记进行芸香科（Rutaceae）柑橘属 （CitrusL.）品种鉴定的操作程序、结果统计、结果规则 本标准适用于柑橘属品种SSR指纹数据采集和品种鉴定 2规范性引用文件 PUBI 室用双规格和试验方法 GB/T6682分析 实验 植物品种特定性 NY/T 2435 和稳定性测试指南 植物品种鉴定 DNA分标记 NY/T 2594 S 3术语和定义 NY/T2594 界定的术语 和定义适用于 试剂见附 主要仪器设备 5溶液配制 溶液配制方法见 6引物相关信息及使用 川见附录 核心引物名单及序 核 位及时筛选拓 科校人提出特异引物用于鉴定。检测机构首 使用核心引物，其 展引物并发布相关信息 用 次根据需要使用拓展引物或（和）特异物 定 参照品种及使用 参照品种的名称参见附录E。必要时.可在等位变异检测中同时检测相应参照品种的PCR扩增 产物。 在确认这些品种该位点等位变异大小与参照品种相同 注：多个品种在某一SSR位点上可能具有相同的等位变异。 后，这些品种也可以代替附录D中的参照品种使用。 8操作程序 8.1样品准备 每份样品取不少于3个单株的叶片或其他等效物，混合分析。 8.2DNA提取 将混合后的样品放人液氮预冷的研钵中，加入液氮后迅速研磨叶片多次至粉末状，取适量粉末装人 2mL离心管。每管加人1mL预热（65℃）的2%CTAB提取液，充分混匀，65℃恒温水浴45min～60 1