ICS 13. 020 C 51 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 18203—2000 室内空气中溶血性链球菌卫生标准 Hygienic standard for Streptococcus hemolyticus in indoor air 2000-09-30发布 2001-01-01实施 国家质量技术监督局 发布 GB/T 18203—2000 言 前 城乡居民有70%时间是在室内度过的，故室内空气质量的好坏与人民健康密切相关。本标准遵循 染物的卫生标准之一。 本标准附录A是标准的附录。 本标准由中华人民共和国卫生部提出。 本标准起草单位：同济医科大学、深圳市卫生防疫站。 本标准主要起草人：应晨江、蔡文德、赵美英、袁涛、谢虹、石磊、段文华。 中华人民共和国国家标准 GB/T 18203—2000 室内空气中溶血性链球菌卫生标准 Hygienic standard for Streptococcus hemolyticus in indoor air 1范围 本标准规定了室内空气中溶血性链球菌的最高容许限量值。 本标准适用于室内空气的监测和评价，不适用于生产性场所的室内环境。 标准值 2 室内空气中溶血性链球菌的最高容许限量值（撞击法）<36cfu/m²。 监测检测方法 本标准检验方法为撞击法采集-血营养琼脂培养基测定法。见附录A（标准的附录）。 国家质量技术监督局2000-09-30批准 2001-01-01实施 1 GB/T18203—2000 附录A （标准的附录） 空气中溶血性链球菌的撞击采集-血营养琼脂培养基培养测定法 A1原理 经撞击采集于血营养琼脂培养基上的空气样品，在37C培养24h后，出现$2～4mm界限分明的 完全透明和半透明的溶血圈，圈中见菌落细小（0.5～0.75mm）、灰白色、表面光滑的G+链状无芽孢球 菌，以每立方米空气中的菌落形成数（cfu/m"）表示。 A2试剂 A2.1健康人血（羊血或兔血） A2.2制霉菌素 A2.3普通营养琼脂培养基 A3仪器 A3.1JWL-I型微生物采样器 A3.2超净工作台 A3.3灭菌器、培养箱、显微镜等 A4分析步骤 A4.1血营养琼脂培养基制备步骤 A4.1.1健康人新鲜去纤维蛋白全血：无菌采集健康人肘部静脉血，置于盛有干燥玻璃珠的小瓶内，迅 A4.1.25000u/mL制霉菌素混悬液：无菌临用前摇均匀，有效期为7天。 A4.1.3普通营养琼脂培养基：先将牛肉膏加大1/5～1/6的用量，其他成分的用量不变，制备普通营 养琼脂培养基，定量分装。 A4.1.4血营养琼脂培养基制备：先将普通营养琼脂培养基（4.1.3）完全融化，冷至60C～70C，按 100mL培养基中加入制霉菌素混悬液（4.1.2）溶液1.0mL，混匀，再按每100mL培养基加人健康人 新鲜去纤维蛋白全血（4.1.1)溶液5.0mL，混匀，立即倾入已消毒的塑料平皿（或血平血）中，凝固后随 意抽取数个平皿，置37℃培养24h，呈阴性（咖啡色），备用，平皿置于一4C贮存，有效期为1～14天。 A4.2测定 将血平血置于微生物采样器的撞击盒内，以25L/min流速，采集0.5～2.0min，经37C培养24h， 观察菌落及其溶血圈，必要时涂片、染色、镜检。 A5结果计算 见式(A1)。 M= ......(A1 ) 式中：M一一空气中溶血性链球菌含菌量，cfu/m； - 每皿平均菌落数； t 采样时间，min； 2 GB/T18203—2000 b一采样流量，L/min。 A6 检出限和加标回收率 血平皿上生长的溶血性链球菌菌落数不得超过20cfu；样品加标回收率88.6%士4.82%。