(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202110807826.9 (22)申请日 2021.07.16 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113527500 A (43)申请公布日 2021.10.2 2 (73)专利权人 蒋小滔 地址 510080 广东省广州市白云区京溪沙 太南路1023号10 0栋606房 (72)发明人 蒋小滔　刘璇　吴砂　 (74)专利代理 机构 深圳叁众知识产权代理事务 所(普通合伙) 44434 专利代理师 李国强 (51)Int.Cl. C07K 16/44(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 1/16(2006.01)(56)对比文件 CN 109021 108 A,2018.12.18 AU 2018208191 A1,2019.07.04 US 2019046 659 A1,2019.02.14 US 2018346 592 A1,2018.12.0 6 Nishida, T等.Glypican 3 -Targeted Therapy i n Hepatocel lular Carci noma. 《CANCERS》 .2019,第1 1卷(第9期),文献号13 39， 第1-13页. Li, D等.Persistent Po lyfuncti onal Chimeric Antigen Receptor T Cel ls That Target Glypican 3 El iminate Orthotopic Hepatocel lular Carci nomas in Mice. 《GASTROENTEROLO GY》 .2020,第158卷(第8 期),第 2250-2265页. 审查员 杨策 (54)发明名称 一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的全人源 单克隆 抗体、 其嵌合 抗原受体及应用 (57)摘要 本发明涉及一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的全 人源单克隆抗体， 其包括重链CDR1 ‑CDR3和轻链 CDR1‑CDR3， 其中， 所述重链CDR1 ‑CDR3包括氨基 酸序列1‑3； 所述轻链 CDR1‑CDR3包括氨 基酸序列 4‑6。 本发明还涉及有关该磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 的全人源单克隆抗体的制备方法； 以及基于该磷 脂酰肌醇蛋白聚糖3的全人源单克隆抗体的全人 源嵌合抗原受体。 本发明还涉及该磷脂酰肌醇蛋 白聚糖3的全人源单克隆抗体作为药物在抗肿 瘤、 抗肝癌领域的应用。 权利要求书1页 说明书9页 序列表8页 附图12页 CN 113527500 B 2022.09.20 CN 113527500 B 1.一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的全人源单克隆抗体， 其特征在于， 所述磷脂酰肌醇蛋白 聚糖3的全人源单 克隆抗体包括重链CDR 1‑CDR3和轻链CDR 1‑CDR3， 其中， 所述重链CDR 1‑CDR3分别如氨基酸序列1 ‑3所示； 所述轻链CDR 1‑CDR3分别如氨基酸序列4 ‑6所示； 所述氨基酸序列1 ‑6如SEQ ID No. 1‑SEQ ID No. 6所示。 2.根据权利要求1所述的磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的全人源单克隆抗体， 其特征在于， 所 述重链的氨基酸序列如SEQ  ID No. 7所示。 3.根据权利要求1所述的磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的全人源单克隆抗体， 其特征在于， 所 述轻链的氨基酸序列如SEQ  ID No. 8所示。 4.根据权利要求1所述的磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的全人源单克隆抗体， 其特征在于， 所 述磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的全人源单克隆抗体选自F ab片段抗体、 F(ab')2片段抗体、 单链可 变区片段抗体或双特异性 抗体的一种。 5.一种全人源嵌合抗原受体， 其特征在于， 所述全人源嵌合抗原受体是基于权利要求 1‑4任一项所述的磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的全人源单 克隆抗体制备而成。 6.权利要求1 ‑4任一项所述的磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的全人源单克隆抗体作为制备抗 肝癌的药物的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113527500 B 2一种磷脂酰肌醇 蛋白聚糖 3的全人源 单克隆抗体、 其嵌合 抗原 受体及应用 技术领域 [0001]本发明属于生物基因领域， 具体涉及一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的全人源单克隆 抗体、 其嵌合 抗原受体及应用。 背景技术 [0002]中国是肝癌大国， 2020年， 中国有39万人死于肝癌， 在所有癌症中排第二位， 仅次 于肺癌， 给 人民群众的身体健康带来 严重威胁。 [0003]手术、 放疗和化疗， 是目前临床上治疗肿瘤的三大传统治疗方法。 手术可以切除肉 眼可见或影像学可见 的肿瘤， 但对于通过血液循环和淋巴循环转移的、 肉眼或影像学不可 见的肿瘤细胞则无能为力。 而且肝癌术后的复发率非常高， 其5年生存率只有10％左右。 放 疗和化疗都属于非特异性疗法， 除了杀伤肿瘤细胞外， 对正常组织和细胞尤其是分裂旺盛 的造血干细胞抑制明显， 从而带来明显的副作用。 2008年， 索拉菲尼(Sorafenib)成为第一 个被批准用于临床治疗肝癌的分子靶向药物； 2017年12月， 瑞戈菲尼(Stivarga)作为二线 治疗肝癌的靶向药物在中国获批上市。 然而它们的实际疗效仍远不能令人满意， 患者总体 生存时间只能延长2 ‑3个月。 因此， 亟需开发出新的、 有效的肝癌治疗方法。 [0004]嵌合抗原受体T细胞(ChimericAntigenReceptor ‑Tcell， 简称CAR ‑T)是近几年发 展起来的免疫治疗方法， 已在血液肿瘤的治疗中显示出极强的抗肿瘤效果。 图1示出了嵌合 抗原受体(CAR)结合T细胞形成CAR ‑T的过程示意图。 可见CAR ‑T结合了抗体与T细胞各 自的 优点， 其优点为(1)其胞外区为抗体的可变区， 可以特异性识别肿 瘤抗原； (2)胞内区为T细 胞活化信号分子CD3ζ及辅助刺激分子CD28或4 ‑1BB。 2017年8月和10月， 美国FDA相继批准了 世界上第一和第二个CAR ‑T产品， 分别用于治疗儿童及青年的急性淋巴细胞性白血病和成 人弥漫性大B细胞淋巴瘤。 在全世界范围内， 以CAR ‑T为治疗手段的临床试验近几年呈爆炸 式 增长。 截止2021年6 月， 全世界登记注册的 CAR ‑T临 床试验 (https:// clinicaltrial s.gov/)就达122 0项之多， 其中在中国开展的就有 448项， 占36.72％。 2021年 6月22日， 中国国家药品监督管理局(NMPA)正式批准复星凯特CAR ‑T产品阿基仑赛注射液 (即抗人CD19的CAR ‑T细胞注射液)上市， 这 意味着中国终于 迎来了细胞免疫 治疗元年。 [0005]磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican ‑3， 简称GPC3)是一种硫酸乙酰肝素糖蛋白， 主要 表达于细胞膜表 面。 图2示出了磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的结构示意图。 GP C3核心蛋白包含58 0 个氨基酸， 分子量为70kD， 中间为Furin蛋白酶酶切位点。 Furin蛋白酶裂解Arg358和Cys359 形成40kD的氨基末端亚基和 30kD的羧基末端亚基， 两个亚基以二硫键相连接； 羧基末端通 过与糖基磷脂酰肌醇(GPI)共价结合而锚定于细胞膜上， 两条硫酸乙酰肝素侧链分别位于 Cys495和Cys5 08上。 [0006]GPC3表达具有较高的特异性， 在成人肝癌以及多种儿童恶性实体瘤如卵黄囊肿 瘤、 肝母细胞瘤、 未分化肉瘤、 威尔姆斯肉瘤、 横纹肌肉瘤以及未成熟畸胎瘤等高表达； 在正 常人组织中几乎不表达， 因此其有望成为肝癌和儿童恶性实体瘤免疫治疗的理想靶点之说　明　书 1/9 页 3 CN 113527500 B 3