(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202110877216.6 (22)申请日 2021.07.31 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113577165 A (43)申请公布日 2021.11.02 (73)专利权人 海南黎草纪新生物科技有限公司 地址 570100 海南省海口市美兰区桂林洋 高校区海涛大道3号海南师范大学科 技园产学研大楼B栋2 楼创梦空间 (72)发明人 李艳　李梓源　章文浩　孙学华　 范冠宝　 (74)专利代理 机构 海南汉普知识产权代理有限 公司 46003 代理人 李海峰(51)Int.Cl. A61K 36/82(2006.01) A61P 39/06(2006.01) A61P 9/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61K 133/00(2006.01) 审查员 江雪芹 (54)发明名称 一种用于山茶花多酚的提取方法 (57)摘要 本发明提供一种用于山茶花多酚的提取方 法， 提取步骤如下： (1)山茶花粉末的制备： 将山 茶花冷冻粉碎， 过筛； (2)浸提液的制备： 将山茶 花粉末加入提取液中， 超声 提取， 制得提取液， 所 述提取液由丙酮、 生物酶、 冰醋酸和水制得； (3) 过滤： 将吸附剂加入步骤(2)制得的浸提液中， 振 荡吸附， 过滤， 制得多酚滤液； (4)萃取： 将步骤 (3)得到的多 酚滤液分别使用饱和正丁 醇和乙酸 乙酯进行萃取， 制得山 茶花多酚粗提液； (5)浓缩 干燥： 将步骤(4)制得的山茶花多酚粗提液进行 浓缩干燥， 制得山茶花多酚。 本发明提取方法不 仅使用较少的有机溶剂， 操作简单， 而且山茶花 多酚提取率均高于19％， 纯度均高于95％。 权利要求书1页 说明书7页 CN 113577165 B 2022.04.05 CN 113577165 B 1.一种山茶花多酚的提取 方法， 其特 征在于， 通过以下步骤进行提取： (1)山茶花粉末的制备： 将山茶花低温冷冻粉碎， 过筛； (2)浸提液的制备： 将山茶花粉末加入提取液中， 料液重量比为1:5～10， 进行超声提 取， 所述超声提取时间为30～40min， 超声频率为10～20kHz， 超声功率为20～25W， 超声温度 为40～50℃， 制得浸提液， 按质量百分比计， 所述提取液由20～40％的丙酮、 0.5～1.5％的 生物酶、 2～5％冰醋酸和余量的水制得， 所述生物酶 由质量比为1～3:2～5:0.5～1.5的纤 维素酶、 离析酶和超氧化物歧化酶制得； (3)过滤： 将吸附剂加入步骤(2)制得的浸提液中， 所述吸附剂由质量比为5～10:1～3: 4～7的活性白土、 不溶性壳聚糖和海藻酸钙制得， 振荡吸附30～40min， 所述 吸附剂和浸提 液的质量比为0.0 5～0.2： 1， 过 滤， 制得多酚滤 液； (4)萃取： 将步骤(3)得到 的多酚滤液使用饱和正丁醇进行萃取， 萃取时间10～15s， 过 滤， 取水层， 再用乙酸乙酯萃取5～10s， 制得山茶花多酚粗提液， 所述多酚滤液和 饱和正丁 醇体积比为1:2 ～3， 所述水层和乙酸乙酯体积比为1:1～ 2； (5)浓缩干燥： 将步骤(4)制得的山茶花多酚 粗提液液进行浓 缩干燥， 制得山茶花多酚。 2.如权利要求1所述的山茶花多酚的提取方法， 其特征在于， 步骤(1)中， 所述冷冻温度 为‑5～2℃， 冷冻时间为10～15mi n。 3.如权利要求1所述的山茶花多酚的提取方法， 其特征在于， 步骤(5)中， 所述浓缩干燥 干燥温度为6 0～70℃， 干燥时间为1～ 2h。 4.如权利要求1所述的山茶花多酚的提取方法， 其特征在于， 所述冰醋酸体积分数为40 ～50％。 5.如权利要求1所述的山茶花多酚的提取方法， 其特征在于， 步骤(3)中， 所述振荡功率 为80～10 0r/min。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113577165 B 2一种用于山茶花多 酚的提取方 法 技术领域 [0001]本发明涉及多酚 提取领域， 特别涉及一种用于山茶花多酚的提取 方法。 背景技术 [0002]多酚是具有多种功能活性的天然药物的重要 成分之一， 可能对疾病的预防有不错 的效果。 例如多酚可以预防心脑血管等慢性疾病， 有很强的清除自由基的能力可以降低氧 化作用， 还能降低肿瘤生成几率和减少癌变的风险。 例如， CN201710612581.8西南山茶花中 茶多酚的制备方法， 该方法以干燥的西南山茶花为原料， 以50～80％的丙酮水溶液为溶剂 进行回流提取， 提取液浓缩干燥后转溶于水、 过滤， 滤液经D M130大孔树脂吸附后， 用蒸馏水 洗脱杂质， 再以浓度为20～60％乙醇溶液洗脱， 采集乙醇脱 液， 浓缩干燥后得西南山茶花的 茶多酚产品， 该方法使用较多有机溶剂。 CN201310089287.5一种从山茶花花卉中提取多酚 的方法， 该方法通过以下步骤： (1)山茶花粉末制备； (2)浸提液的制备； (3)树脂吸附制得山 茶花多酚。 该方法使用较多的有机溶剂 。 因此， 需要 方便、 快速， 使用减少的有机溶剂山茶花 多酚的提取 方法， 通过 该方法提高山茶花多酚的收率和纯度。 发明内容 [0003]鉴以此， 本发明提出一种用于山茶花多酚的提取方法， 不仅实现使用较少的有机 溶剂提取山茶花中的多酚， 而且提高山茶花多酚的收率和纯度。 [0004]本发明的技 术方案是这样实现的： [0005](1)山茶花粉末的制备： 将山茶花低温冷冻粉碎， 过筛 。 [0006](2)浸提液的制备： 将山茶花粉末加入提取液中， 料液重量比为1:5～10， 进行超声 提取制得浸提液， 所述提取液 由丙酮、 生物酶、 冰醋酸和水制得； 本发明通过超声提取山茶 花中的多酚， 超声时间、 频率、 功率和功率经过大量实验得出， 本发明中所采用的超声参数 和提取液相互配合， 使细胞壁快速 分解， 多酚快速浸出。 提取液中添加少量的冰醋酸提高提 取液的渗透作用， 在生物酶的作用下， 不仅提高了山茶花中多酚的浸 出速率， 而且去除步骤 (1)中低温粉碎产生的过氧化物， 提高多酚的纯度， 同时， 本发明使用少量的有机溶剂进行 提取多酚， 提供了一种绿色环保、 经济效益高的提取 方法。 [0007](3)过滤： 将吸附剂加入步骤(2)制得的浸提液中， 振荡吸附30～40min， 过滤， 制得 多酚滤液； 本发明吸附剂合理配比， 有效吸附浸提液中的杂质， 提高多酚纯度。 [0008](4)萃取： 将步骤(3)得到的多酚滤液使用饱和正丁醇和进行萃取， 萃取时间10～ 15s， 过滤， 取水层， 再用乙酸乙酯萃取5～10s， 制得山茶花多酚粗提液， 所述多酚滤液和饱 和正丁醇体积比为1:2 ～3， 所述水层和乙酸乙酯体积比为1:1～ 2。 [0009](5)浓缩干燥： 将步骤(4)制得的山茶花多酚粗提液进行浓缩干燥， 制得山茶花多 酚。 [0010]进一步的， 步骤(1)中， 所述冷冻温度为 ‑5～2℃， 冷冻时间为10～15mi n。 [0011]进一步的， 步骤(1)中， 所述粉碎为使用料理机进行粉碎。说　明　书 1/7 页 3 CN 113577165 B 3