(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202110739502.6 (22)申请日 2021.06.30 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113456828 A (43)申请公布日 2021.10.01 (73)专利权人 广州市第一人民医院 （广州消化 疾病中心、 广州医科 大学附属市 一人民医院、 华 南理工大 学附属 第二医院） 地址 510180 广东省广州市越秀区盘福路1 号 (72)发明人 袁友永　刘晔　姜茂麟　罗诗维　 杨蕊梦　江新青　(74)专利代理 机构 广州三环专利商标代理有限 公司 44202 专利代理师 陈旭红　晏静文 (51)Int.Cl. A61K 47/60(2017.01) A61K 31/704(2006.01) C07D 405/10(2006.01) A61P 35/00(2006.01) C08F 293/00(2006.01) C08F 220/38(2006.01) C08G 65/334(2006.01) 审查员 胡议文 (54)发明名称 一种氧化还原响应性顺序释药系统及其制 备方法与应用 (57)摘要 本发明公开了一种氧化还原响应性顺序释 药系统及其制备方法与应用。 本发 明的氧化还原 响应性顺序释药系统是一种是基于活性氧敏感 的硫醇缩酮键和谷胱甘肽敏感的二硫键合成的 一种双响应顺序释药系统， 用于顺序递送CyNH2 和化疗药物， 协同增效， 以增强癌症治疗效果。 本 发明的氧化还原响应性顺序释药系统集合了对 肿瘤微环境的响应、 顺序药物释放、 协同治疗和 制造外源性ROS等特点， 很好地克服现有技术的 局限性。 权利要求书3页 说明书11页 附图15页 CN 113456828 B 2022.08.16 CN 113456828 B 1.一种氧化还原响应性 顺序释药系统的制备 方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： (1)合成聚合物mPEG ‑CPDB 将聚乙二醇单甲醚mPEG、 4 ‑氰基‑4‑(硫代苯甲硫基)戊酸CPDB、 4 ‑(二甲氨基)吡啶DMAP 和二环己基碳 二亚胺DCC溶于溶剂中， 反应， 得到mPEG ‑CPD； (2)合成单体MTK 将巯基乙酸和丙酮 混合， 反应， 得到的TK ‑COOH和硼氢化钠溶解在四氢呋喃中， 加入碘， 第二次反应， 淬灭反应后纯化， 得到的TK ‑OH与三乙胺溶解在二氯甲烷中， 加入甲基丙烯酰 氯， 再次反应， 纯化， 干燥， 得到 MTK； (3)合成单体MSS 将甲基丙烯酰氯与溶解在二氯甲烷中的2,2' ‑二硫代二乙醇、 三乙胺混合， 反应， 纯化， 干燥， 得到 MSS； (4)合成带有活性氧响应键的聚合物mPEG ‑PTK 将步骤(1)中所述mPEG ‑CPDB、 步骤(2)中所述MTK和偶氮二异丁腈AIBN溶解在二氧己环 中， 反应， 分离， 得到mPEG ‑PTK； (5)合成带有谷胱甘肽响应键的聚合物mPEG ‑PSS 将步骤(1)中所述mPEG ‑CPDB、 步骤(3)中所述MSS和AIBN溶解在1,4 ‑二氧六环 中， 反应， 分离， 得到mPEG ‑PSS； (6)合成带有ROS响应键的载 药聚合物系统 将步骤(4)中所述mPEG ‑PTK和对硝基苯氯甲酸NPC溶解在DCM中， 反应， 分离， 得到粗产 物TEA， 将其和化疗药物溶解在N,N ‑二甲基甲酰胺DMF中， 再次反应， 纯化， 得到mPEG ‑PDurg； (7)合成带有谷胱甘肽响应键的载 药聚合物mPEG ‑PCy 将双(三氯甲基)碳酸酯、 CyNH2、 N,N‑二异丙基乙胺DIPEA与乙腈混合， 反应， 去除溶剂， 加入溶于DC M的步骤(5)所述mPEG ‑PSS， 再次反应， 纯化， 得到mPEG ‑PCy； (8)合成氧化还原响应性 顺序释药系统P PDCy 将步骤(6)中所述mPEG ‑PDurg和步骤(7)所述mPEG ‑PCy溶解在二甲基亚砜中， 再与水混 合， 反应， 透析， 得到P PDCy。 2.根据权利要求1所述氧化还原响应性 顺序释药系统的制备 方法， 其特 征在于， 步骤(1)中所述mPEG、 CP DB、 DMAP以及DC C的用量按照摩尔比1： 1 ‑5： 1‑5： 1‑5配比计算； 步骤(1)中所述溶剂为 二氯甲烷、 氯仿、 四氢呋喃 中至少一种； 步骤(1)中所述溶剂的用量 为按照1g mPEG配比10 ‑35mL溶剂计算； 步骤(2)中所述巯基乙酸和丙酮的摩尔比为1： 1 ‑2； 步骤(2)中所述TK ‑COOH和硼氢化钠按照质量比1： 1 ‑5配比； 步骤(2)中所述四氢呋喃与TK ‑COOH按照1g  TK‑COOH配比5‑30mL四氢呋喃计算； 步骤(2)中所述 碘和硼氢化钠按照质量比1 ‑4： 1配比； 步骤(2)中所述TK ‑OH和三乙胺的摩尔比为1 ‑3： 1； 步骤(2)中所述甲基丙烯酰氯与TK ‑OH的摩尔比为1： 1 ‑2； 步骤(2)中所述 二氯甲烷与TK ‑OH按照1g  TK‑OH配比20 ‑50mL二氯甲烷计算。 3.根据权利要求1或2所述氧化还原响应性 顺序释药系统的制备 方法， 其特 征在于， 步骤(1)中所述反应为搅拌 反应20‑30h；权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 113456828 B 2步骤(2)中所述反应的时间为 4‑8h； 步骤(2)中所述第二次反应为回流反应24 ‑48h； 步骤(2)中所述再次反应为搅拌 反应7‑15h。 4.根据权利要求1所述氧化还原响应性 顺序释药系统的制备 方法， 其特 征在于， 步骤(1)中所述mPEG ‑CPD在下一步反应前 过滤， 采用冷乙醚 沉淀， 真空干燥； 步骤(2)中所述反应在N2气氛下搅拌进行； 步骤(2)中所述TK ‑COOH与硼氢化钠溶解在四氢呋喃前 经过冷却， 过 滤， 洗涤； 所述洗涤为分别采用己烷和水洗涤； 步骤(2)中所述纯化的步骤： 将再次反应的产物真空下除去溶剂， 混合物溶解在氢氧化 钠溶液中， 乙酸乙酯萃取， 干燥， 真空下浓 缩， 硅胶柱纯化， 真空干燥过夜； 所述硅胶柱纯化以体积比为1： 1 ‑3的DCM/乙酸乙酯作为洗脱剂； 步骤(2)中所述纯化是采用硅胶柱纯化； 所述硅胶柱纯化以体积比为1： 1的DC M/乙酸乙酯作为洗脱剂。 5.根据权利要求1所述氧化还原响应性 顺序释药系统的制备 方法， 其特 征在于， 步骤(3)中所述2,2' ‑二硫代二乙醇和三乙胺的摩尔比为1 ‑5： 1； 步骤(3)中所述甲基丙烯酰氯与2,2' ‑二硫代二乙醇的摩尔比为1： 1 ‑2； 步骤(3)中所述 二氯甲烷与三乙胺按照1g三乙胺配比40 ‑80mL二氯甲烷计算； 步骤(4)中所述mPEG ‑CPDB和MTK的质量比为1： 1 ‑3； 步骤(4)中所述mPEG ‑CPDB和AIBN的质量比为1： 0.01 ‑0.02； 步骤(4)中所述 二氧己环的与mPEG ‑CPDB按照1g的mPEG ‑CPDB配比10 ‑50mL计算； 步骤(5)中所述mPEG ‑CPDB和MSS的质量比为1： 1 ‑3； 步骤(5)中所述mPEG ‑CPDB和AIBN的质量比为1： 0.01 ‑0.02； 步骤(5)中所述 二氧己环的与mPEG ‑CPDB按照1g的mPEG ‑CPDB配比10 ‑50mL计算； 步骤(6)中所述mPEG ‑PTK和NPC的质量比为1： 0.5 ‑2； 步骤(6)中所述TEA和化疗药物的摩尔比为1 ‑3： 1； 步骤(6)中所述DC M与NPC按照1g对硝基苯氯甲酸配比20 ‑50mL DCM计算； 步骤(6)中所述DMF与mPEG ‑PTK按照1g  mPEG‑PTK配比20 ‑50mL DMF计算； 步骤(7)中所述CyNH2的用量为1g CyNH2配比0.25 ‑1.5mL DIPEA； 步骤(7)中所述双(三氯甲基)碳 酸酯和CyNH2的质量比为1 ‑2： 1； 步骤(7)中所述乙腈与CyNH2按照1g CyNH2配比20‑100mL乙腈计算； 步骤(8)中所述mPEG ‑PDurg和mPEG‑PCy的质量比为1： 0.8 ‑1.2； 步骤(8)中所述mPEG ‑PDurg和二甲基亚砜按照1g  mPEG‑PDurg配比100mL二甲基亚砜计算； 步骤(8)中所述mPEG ‑PDurg和水按照1g  mPEG‑PDurg配比1900‑2100mL水计算。 6.根据权利要求1或5所述氧化还原响应性 顺序释药系统的制备 方法， 其特 征在于， 步骤(3)中所述反应为搅拌 反应7‑15h； 步骤(4)中所述反应是在6 5℃‑85℃下搅拌 反应12‑24h； 步骤(5)中所述反应是在6 5℃‑85℃下搅拌 反应12‑24h； 步骤(6)中所述反应为搅拌 反应12‑48h； 步骤(6)中所述再次反应搅拌 反应24‑48h；权　利　要　求　书 2/3 页 3 CN 113456828 B 3