(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111018749.5 (22)申请日 2021.09.01 (71)申请人 苏州璞惠卓 越生物科技有限公司 地址 215011 江苏省苏州市虎丘区高新区 城际路21号2幢70 5室 (72)发明人 杨光　朱毅敏　 (74)专利代理 机构 锦州辽西专利事务所(普通 合伙) 21225 代理人 王佳佳 (51)Int.Cl. C12N 5/10(2006.01) C12N 15/62(2006.01) A61K 39/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种抑制蛋白阻断型嵌合抗原受体修饰的 免疫细胞及其用途 (57)摘要 一种抑制蛋白阻断型嵌合抗原受体修饰的 免疫细胞及其用途， 该抑制蛋白阻断型嵌合抗原 受体修饰的免疫细胞用于治疗恶性肿瘤的药物， 是通过阻断蛋白与嵌合抗原受体共表达于免疫 细胞； 其中， 阻断蛋白的核酸序列如SEQ  ID NO: 3， 蛋白序列如SEQ  ID NO:4； 阻断蛋白与嵌合抗 原受体共表达 的核酸序列如SEQ  ID NO:5， 蛋白 序列如SEQ  ID NO:6。 本发明从阻断免疫细胞负 调控信号的转导角度出发， 使CAR ‑T细胞表达阻 断蛋白， 减弱/阻止负调控信号传递， 增 强CAR‑T 细胞抗肿瘤活性； 无需与免疫检查点抗体药联合 使用就能增强抗肿瘤免疫反应， 降低用药成本， 且给药量可以精准确定， 疗效确 切显著。 权利要求书1页 说明书7页 序列表8页 附图3页 CN 113913385 A 2022.01.11 CN 113913385 A 1.一种抑制蛋白阻断型嵌合抗原受体修饰的免疫细胞， 其特征在于： 阻断蛋白与嵌合 抗原受体共表达于免疫细胞， 阻断蛋白阻隔免疫细胞负调控信号的转导， 增强免疫细胞激 活信号； 所述阻断蛋白的核酸序列如SEQ  ID NO:3、 蛋白序列如SEQ  ID NO:4。 2.根据权利要求1所述的抑制蛋白阻断型嵌合抗原 受体修饰的免疫细胞， 其特征在于： 所述阻断蛋 白与嵌合抗原受体共表达的核酸序列如SEQ  ID NO:5、 蛋白序列如SEQ  ID NO: 6。 3.根据权利要求1所述的抑制蛋白阻断型嵌合抗原 受体修饰的免疫细胞， 其特征在于： 所述免疫细胞为T细胞或NK细胞。 4.如权利要求1 ‑3任意一项所述的抑制蛋白阻断型嵌合抗原受体修饰的免疫细胞在制 备治疗恶性肿瘤的药物的用途。 5.根据权要求 4所述的用途， 其特 征在于： 所述药物用于血 液恶性肿瘤。 6.根据权要求 4所述的用途， 其特 征在于： 所述药物用于靶向CD19的血 液恶性肿瘤。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113913385 A 2一种抑制蛋白阻断型嵌合 抗原受体 修饰的免疫细胞及其用途 技术领域 [0001]本发明涉及 生物医药领域， 尤其涉及一种抑制蛋白阻断型嵌合抗原受体修饰的免 疫细胞及其用途。 背景技术 [0002]目前， CAR ‑T免疫疗法在肿瘤治疗领域取得了令人瞩目的临床进展， 同时免疫检查 点阻断剂如PD1/PD ‑L1抗体药也在肿瘤 治疗中取得了喜人的疗效。 CAR ‑T免疫疗法是提取免 疫细胞， 通过体外的培养进行扩增， 再利用基因工程技术给免疫细胞镶嵌上能识别癌细胞 的基因片段， 再将该免疫细胞回输到病人的体内； PD ‑1抗体药本身 是不会杀灭癌细胞的， 它 是通过解除对免疫细胞的抑制， 重新激活免疫细胞； 二者的抗肿瘤机理不同， 为进一步提高 疗效， 临床已有研究进行CAR ‑T和PD1抗体药联用， 以解除CAR ‑T的免疫抑制。 然而， 两种抗体 药价格均较昂贵， 且二者联合用药， 其给药量很难精准确定， 疗效存在不确切 性， 因此两种 疗法联用无论从治疗费用还是临床给 药都带来更 大的压力。 [0003]PD1抗体药的机制是以竞 争PD‑L1的方式阻断免疫细胞的负调控信号， 解除免疫细 胞的抑制， 增强抗肿瘤 活性。 事实上， 阻断PD1胞内的信号转导， 即使PD1与PD ‑L1相互作用， 也会解除免疫细胞的免疫抑制。 阻断蛋白Blocker是SHP2蛋白酪氨酸磷酸酶的N端截短蛋 白。 SHP2在PD1的下游， 通过使TCR受体去磷酸化(如CD3zeta的ITAM)来帮助PD1抑制T细胞的 活性。 [0004]阻断蛋白Blocker可以结合PD1的胞内区但不具备去磷酸化功能， 因此过表达的 Blocker可以竞争结合PD1胞内结构域， 阻断正常SHP2的抑制功能。 因此联合CAR共表达阻断 蛋白Blocker， 可以起到甚至优于P D1抗体联用的效果， 增强抗肿瘤功能。 [0005]但是， 目前还 没有文献公开阻断蛋白(Blocker)来增强CAR ‑T细胞抗肿瘤活性的内 容。 发明内容 [0006]本发明为解决上述技术问题， 提供一种抑制蛋白阻断型嵌合抗原受体修饰的免疫 细胞及其用途。 [0007]为了能够达 到上述所述目的， 本发明采用以下技 术方案： 一种抑制蛋白阻断型嵌合抗原受体修饰的免疫细胞， 其特殊之处在于： 抑制蛋白 阻断型嵌合抗原受体修饰的免疫细胞通过阻断蛋白与嵌合抗原受体共表达于免疫细胞， 所 述阻断蛋白阻隔免疫细胞负调控信号的转导， 增强免疫细胞激活信号； 所述阻断蛋白的核 酸序列如SEQ  ID NO:3、 蛋白序列如SEQ  ID NO:4。 [0008]作为进一步的优选， 所述阻断蛋白与嵌合抗原受体共表达的核酸序列如SEQ  ID  NO:5、 蛋白序列如SEQ  ID NO:6。 [0009]作为进一 步的优选， 所述免疫细胞为T细胞或NK细胞。 [0010]一种如上述的抑制蛋白阻断型嵌合抗原受体修饰的免疫细胞在制备治疗恶性肿说　明　书 1/7 页 3 CN 113913385 A 3