(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202110990885.4 (22)申请日 2021.08.26 (66)本国优先权数据 202110426868.8 2021.04.20 CN (71)申请人 兰州大学 地址 730000 甘肃省兰州市城关区天水南 路222号兰州大 学 (72)发明人 史彦斌　张佳宁　 (51)Int.Cl. A61K 9/107(2006.01) A61K 31/191(2006.01) A61K 41/00(2020.01) A61K 45/06(2006.01) A61K 47/54(2017.01) A61K 47/60(2017.01)A61P 35/00(2006.01) B82Y 5/00(2011.01) B82Y 40/00(2011.01) (54)发明名称 一种大黄酸肿瘤靶向纳米胶束的制备方法 (57)摘要 本发明涉及一种用于抗肿瘤靶向纳米胶束 的制备方法， 包括下述步骤； (1)合成胶束前体两 亲性大分子： 将叶酸 ‑聚乙二醇2 000、 大黄酸溶解 于DMSO中活化后， 常温酰化反应制备成两亲性大 分子； (2)两亲性大分子的提纯： 将反应后的体系 置于透析袋中， 透析除去DMSO并冻干， 柱层析法 分离纯化。 红外光谱、 核磁共振氢谱、 液相色谱表 征； (3)有机溶剂 蒸发法制备胶束： 将两 亲性大分 子溶于二氯甲烷， 并加入去离子水， 旋蒸除去二 氯甲烷后超声， 充分分散得纳米胶束溶液； 该制 备方法容易， 反应条件简便易实现， 有利于工业 化生产。 该发 明可有效解决难溶性抗肿瘤药物胶 束载药量低、 分布选择性差和生物利用度低的不 足， 还可通过共包载其他药物实现协同抑制肿瘤 细胞繁殖的作用。 权利要求书1页 说明书5页 附图5页 CN 115212167 A 2022.10.21 CN 115212167 A 1.肿瘤靶向纳米胶束叶酸 ‑聚乙二醇 ‑大黄酸(FA ‑PEG‑RH)的制备 方法， 包括下述 步骤： (1)两亲性大分子的合成： 将叶酸 ‑聚乙二醇2000、 大黄酸溶解于DMSO中， 加入微量N， N'‑二环己基碳二亚胺和4 ‑二甲基氨基吡啶作为催化剂， 低温环境活化后置于磁力搅拌器 上搅拌进行酰 化反应； (2)两亲性大分子的提纯： 将合成混合物放入透析袋 中， 在黑暗中用去离子水透析后冷 冻干燥。 硅胶柱色谱分离， 旋转蒸发仪中回收溶剂。 最终 获得橙色粉末， 并在黑暗中储 存； (3)胶束的制备方法： 两亲性大分子与钛菁锌溶解于少量二氯甲烷中， 并加入少量去离 子水， 旋转蒸发除去 有机溶剂， 充分 分散得纳米胶束溶 液。 2.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于： 作为优选， 步骤(1)中叶酸 ‑聚乙二醇 2000与大黄酸的摩尔比为1： 1.5 。 3.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于： 作为优选， 步骤(1)中活化条件为0 ‑5 ℃30min， 酰化反应条件为避光常温24h 。 4.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于： 作为优选， 步骤(2)中透析袋的规格为 1000DA， 透析袋中液体与透析介质体积比为1： 15 0。 5.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于： 作为优选， 步骤(2)中柱层析流动相为 石油醚： 甲酸乙酯： 甲酸(15:5:1， v/v/v)。 6.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于： 作为优选， 步骤(3)中溶解于二氯甲烷 中的胶束浓度约为0.2mg/mL， 二氯甲烷与去离 子水的体积比为1： 1。 7.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于： 作为优选， 步骤(3)中充分分散方法为 避光常温超声20mi n。 8.一种肿瘤靶向纳米胶束， 其是应用权利要求1 ‑7任一项所述的制备方法制备的得到 的。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115212167 A 2一种大黄酸肿瘤靶向纳米胶束 的制备方 法 【技术领域】 [0001]本发明涉及一种大黄酸肿瘤靶向纳米胶束的制备 方法。 【背景技术】 [0002]纳米载药递送系统可有效增加药物溶解度、 保护药物免受代谢， 改善药物体内吸 收与分布、 借助肿瘤组织的透过性增强及滞留效应提高对肿瘤组织的靶向抑杀效果。 另外， 通过在纳米载药颗粒或液滴表面连接肿瘤组织高表达受体的配体， 可引导纳米载药系统靶 向运输至肿瘤组织， 有效降低对非肿瘤组织的不良作用， 这些优势使靶向纳米制剂近年来 得到了广泛关注。 [0003]胶束是纳米载药系统的一种， 是具有柔性的两亲性分子 的亲脂尾端聚于内部， 极 性亲水头端则露于外部， 形成球形或其他形状的微纳米药物载体， 难溶性药物包载在疏水 核内。 由于两亲性分子占比很大， 所以传统的载药胶束的载药量很低， 导致服药剂量很大。 若将具有活性的小分子药物本身作为两亲性分子的一端， 制备成胶束， 这样可有效增加胶 束的载药量， 同时还 可包载疏水性活性分子， 起到协同治疗效果。 如果把具有靶向肿瘤性质 的小分子(如叶酸)作为胶束的亲水端， 则可引导胶束选择性浓集于肿瘤组织， 提高药物被 肿瘤组织摄取的比率， 同时减少 对其他组织的不良作用。 大黄酸(RH)是甘肃省传统道地药 材大黄的主要成分之一， 其具有抗肿瘤、 抑制骨关节炎、 肺保护、 肾保护等作用。 然而 大黄酸 水溶性较差， 生物利用度低， 难以制成注射剂供肿瘤患者注 射使用， 阻碍了以大黄酸为主体 的抗肿瘤天然 药物研发。 因而， 如何提高大黄酸的溶解度和生物利用度， 是以大黄酸为主要 成分的抗癌制剂研发的重点之一。 【发明内容】 [0004]本发明所指叶酸 ‑聚乙二醇 ‑大黄酸(FA ‑PEG‑RH)的制备 方法， 包括下述 步骤： [0005](1)两亲性大分子的合成： 将叶酸 ‑聚乙二醇2000、 大黄酸溶解于DMSO 中， 加入微量 N， N'‑二环己基碳二亚胺和4 ‑二甲基氨基吡啶作为催化剂， 活化后置于磁力搅拌器上搅拌 进行酰化反应。 [0006](2)两亲性大分子的提纯： 将合成混合物放入透析袋中， 在黑暗中用去离子水透析 后冷冻干燥。 硅胶柱色谱分离， 旋转蒸发仪中回收溶剂。 最终获得橙色粉末， 并在黑暗中储 存。 [0007](3)胶束的制备方法： 两亲性大分子与钛菁锌溶解于少量二氯甲烷中， 并加入少量 去离子水， 旋转蒸发除去 有机溶剂， 充分 分散得纳米胶束溶 液。 [0008]包载疏水药物不限于钛菁锌， 包含一切可包载于胶束作为注射剂的疏水性抗肿瘤 药物。 [0009]作为优选， 步骤(1)中叶酸 ‑聚乙二醇20 00与大黄酸的摩尔比为1： 1.5 。 [0010]作为优选， 步骤(1)中活化条件为0 ‑5℃30min， 酰化反应条件为避光常温24h 。 [0011]作为优选， 步骤(2)中透析袋的规格为1000DA， 透析袋中液体与透析介质体积比为说　明　书 1/5 页 3 CN 115212167 A 3