(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202110880049.0 (22)申请日 2021.08.02 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113563513 A (43)申请公布日 2021.10.2 9 (73)专利权人 苏州健雄职业技术学院 地址 215411 江苏省苏州市太 仓市科教新 城健雄路1号 (72)发明人 王杨　常柏松　方渊　陶登武　 (74)专利代理 机构 苏州市方略专利代理事务所 (普通合伙) 32267 专利代理师 刘燕娇 (51)Int.Cl. C08F 226/06(2006.01) C08F 220/58(2006.01) C08F 222/38(2006.01) C08K 3/08(2006.01) A61K 9/06(2006.01) A61K 33/34(2006.01) A61K 47/32(2006.01)A61P 35/00(2006.01) A23L 33/16(2016.01) A23L 29/288(2016.01) (56)对比文件 CN 10983 6534 A,2019.0 6.04 CN 10701 1527 A,2017.08.04 CN 112250887 A,2021.01.2 2 CN 106890332 A,2017.0 6.27 US 2009123544 A1,2009.05.14 Wei Yan,etal. .Facile Synthesis of Ultrastable Fluorescent Cop per Nanoclusters and Their Cel lular Ima ging Application. 《nanomaterials》 .2020, Hai‑Yan Liu,etal. .A method for synthesizi ng copper nanoclusters based o n protein–polyacrylamide gel and its application. 《Journal of the Iran ian Chemical Society 》 .2020, (续) 审查员 朱爱玉 (54)发明名称 一种基于温敏性聚合物水凝胶的发光铜纳 米簇的制备方法及应用 (57)摘要 本发明提出一种基于温敏性聚合物水凝胶 的发光铜纳米簇的制备方法， 包括以下步骤： S1： 以N‑乙烯基己内酰胺(VCL)或异丙基丙烯酰胺 (NIPAM)为主要单体、 N ‑羟甲基丙烯酰胺(NMAM) 为共聚单体， N,N ‑亚甲基双丙烯酰胺(MBA)和N, N'‑双(丙烯酰)胱胺(B AC)为共交联剂， 以有机 溶 剂为溶剂， 合成聚合物纳米 水凝胶； S2： 以步骤S1 合成的聚合物纳米水凝胶为模板， 以水为介质、 加入还原剂与含铜化合物合成聚合物凝胶 ‑ CuNCs； 本法制备的发光铜纳米簇具有良好的细 胞抗氧化 酶的活性和稳定性， 粒子大小有利于细 胞吸收， 将复合材料冻干成粉末， 更有利于保存；其发光特性可用于通过光学显微镜对细胞进行 成像， 无需额外的染料； 可 以作为药物成分调节 细胞中的ROS水平或者作为抗肿瘤药物的载体协 同抑制癌细胞增殖。 [转续页] 权利要求书2页 说明书7页 附图5页 CN 113563513 B 2022.09.02 CN 113563513 B (56)对比文件 赵婧等.温度/pH敏感型壳聚糖水凝胶的制 备及其性能. 《应用化工》 .2018,(第0 5期), Ani Baghdasaryan,etal. .Copper nanoclusters: designed s ynthesis, structural diversity, and multiplatform applications. 《Nanoscale》 .2021, Yang Wang,etal. .Temperature- responsive iro n nanozymes based o n poly (N-vinylcapro lactam) w ith multi-enzy me activity. 《RSC Advances》 .2020, Bailong Tao,etal. .Copper nanoparticles embed ded hydrogel for killing bacteria and promoti ng wound healing with photothermal therapy. 《Journal of Materials C hemistry B 》 .2019, Rama Ghosh,etal. .Synergistic Anticancer Activity of Fluorescent Cop per Nanoclusters and Cisplati n Delivered Through a Hydrogel Nan ocarrier. 《ACS Applied Materials & I nterfaces》 .2014,2/2 页 2[接上页] CN 113563513 B1.一种基于温敏性聚合物水凝胶的发光铜纳米簇的制备方法， 其特征在于， 包括以下 步骤： S1： 以N‑乙烯基己内酰胺(VCL)或异丙基丙烯酰胺(NIPAM)为主要单体、 N ‑羟甲基丙烯 酰胺(NMAM)为共聚单体， N,N ‑亚甲基双丙烯酰胺(MBA)和N,N' ‑双(丙烯酰)胱胺(BAC)为共 交联剂， 以有机溶剂为溶剂， 合成聚合物纳米水凝胶； S2： 以步骤S1合成的聚合物纳米水凝胶为模板， 以水为介质、 加入还原剂谷胱甘肽与含 铜化合物合成聚合物凝胶 ‑CuNCs； 所述含铜化 合物包括硝酸铜、 氯化铜和硫酸铜。 2.根据权利要求1所述的一种基于温敏性聚合物水凝胶的发光铜纳米簇的制备方法， 其特征在于， 所述有机溶剂包括乙腈。 3.根据权利要求1所述的一种基于温敏性聚合物水凝胶的发光铜纳米簇的制备方法， 其特征在于， 包括以下 具体步骤： S1： P(VCL/N IPAM‑co‑NMAM)纳米水凝胶的制备： 在圆底烧瓶中加入1.15～10.36  mM N‑乙烯基己内酰胺(VCL)或N ‑异丙基丙烯酰胺 (NIPAM)， 0.209～5.70  mM N‑羟甲基丙烯酰胺(NMAM)， 0.2 1～0.96 mM 的摩尔比1:3～3:1 的N,N‑亚甲基双丙烯酰胺(MB A)和N,N' ‑双(丙烯酰)胱胺(BA C)， 0.038～ 0.192 mM偶氮二异 丁腈(AIBN)， 10～30  mL的乙腈溶液， 超声分散均匀后， 放入磁子， 安装加热回流装置， 打开 磁力搅拌， 搅拌速度400～800  rpm/min， 升温至80～95   °C开始反应， 恒温回流反应2～4  h 结束， 将白色乳液倒出， 4000～7000  r/min速度离心5～10  min， 倒去上层溶液， 用无水乙醇 洗涤、 离心， 反复2 ～3次； 产物经自然干燥或者冷冻干燥， 得到白色粉状产品； S2： P(VCL/N IPAM‑co‑NMAM)‑CuNCs的制备： 圆底烧瓶中， 量取0.5  mL 固含量为0.020~0.050 g/mL P(VCL/NIPAM   ‑co‑NMAM)纳米 凝胶水溶液， 加入9.5  mL 0.01~0.1 M pH 8.0 缓冲溶液； 分散均匀后， 向上述凝胶水溶液 中加入0.154~0.307 g GSH， 搅拌使之充分溶解， 3 7℃下搅拌反应6~12 h ， 搅拌速率为300~ 600 rpm/min； 向上述反应混合液中加入0.2~0.6 mL的0.1 M的硝酸铜溶液， 300~600 rpm/ min 搅拌速率下反应30~60 min； 加热至60~80℃继续反应20~40 min， 溶液一直为白色乳 液， 再加入0.5~1.2 mL 1M氢氧化钠溶液， 此时溶液变为淡黄色的乳液， 反应结束； 将反应 混 合物用纯水在5000~8000 rpm/min 下离心洗涤2次， 收集沉淀并冷冻干燥得白色粉末， 即为 基于温敏性聚合物水凝胶的发光铜纳米簇P(VCL/N IPAM  ‑co‑NMAM)‑CuNCs。 4. 根据权利要求1所述的一种基于温敏性 聚合物水凝胶的发光铜纳米簇的制备方法， 其特征在于， 包括以下 具体步骤： S1： P(VCL ‑co‑NMAM)纳米水凝胶的制备 50 mL圆底烧瓶中加入0.395  g N‑乙烯基己内酰胺(VCL)， 0.395  g N‑羟甲基丙烯酰胺   (NMAM), 0.0586 g (0.380 mM) N,N‑亚甲基双丙烯酰胺(MBA)和0.0989  g ( 0.380 mM)N, N'‑双(丙烯酰)胱胺(BA C)， 0.0158  g偶氮二异丁腈(AIBN)， 20  mL的乙腈溶液， 超声5分钟分 散均匀后， 放入磁子， 安装加热回流装置， 打开磁力搅拌， 搅拌速度500  rpm/min， 升温至90   °C开始反应， 恒温回流反应2  h结束， 将白色乳液倒出， 5000  rpm/min速度离心10  min， 倒去 上层溶液， 用无水乙醇反复离心洗涤 2次， 冷冻干燥后得白色粉末状产品；