ICS 65.150 CCS B 52 吉 DB22 林 省 地 方 标 准 DB 22/T 3306—2021 大麻哈鱼耳石热标记技术规范 Technical specification of otolith thermal marking for Chum salmon 2021 - 11 - 26 发布 吉林省市场监督管理厅 2021 - 12 - 15 实施 发 布 DB22/T 3306—2021 前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》 的 规定起草。 请注意本文件中的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由吉林省农业农村厅提出并归口。 本文件起草单位：吉林省水产科学研究院。 本文件主要起草人：闫春梅、万继武、郑伟、陈伟强、李忠强、柳鹏、韩叶、刘慧吉、王秀兰、李 秀颖、王战蔚。 I DB22/T 3306—2021 大麻哈鱼耳石热标记技术规范 1 范围 本文件规定了大麻哈鱼（Oncorhynchus keta）耳石热标记技术的基本要求、标记要求。描述了对 应的记录与档案等追溯方法。 本文件适用于对大麻哈鱼发眼卵耳石的标记。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 11607 渔业水质标准 NY 5051 无公害食品 淡水养殖用水水质 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 耳石 otolith 硬骨鱼类内耳的钙质结晶。 3.2 耳石热标记 otolith thermal marking 通过人为短期地对水温进行调控以改变耳石上的一个或多个生长轮纹的特征，形成终身可识别的标 记。 4 基本要求 4.1 水质 4.1.1 4.1.2 4.2 水源水质应符合 GB 11607 的规定。 养殖用水水质应符合 NY 5051 的规定。 试剂 无水乙醇、二甲苯应为分析纯，封片剂应为中性树胶。 4.3 4.3.1 设备与器材 设备 1 DB22/T 3306—2021 4.3.1.1 4.3.1.2 4.3.1.3 4.3.1.4 4.3.2 孵化容器，应为非金属材质。 控温装置，精度应在 ±1 ℃ 以内。 耳石摘取设备，体视解剖镜。 耳石检测设备，有拍照系统的显微镜。 器材 解剖剪刀、尖头镊子、不锈钢针、载玻片、抄网。 4.4 标记对象 大麻哈鱼发眼期阶段受精卵。 5 标记要求 5.1 建立标记模式 标记模式，参见附录 A 的规定制定。 5.2 控制水温 控制耳石热标记容器中的水温，高温推荐水温 12 ℃ ± 1 ℃。高温和低温的差距应根据实际情况 在 2 ℃ ～ 4 ℃范围内。高低温转换过程应逐渐调整，适宜在 1 小时内完成。 5.3 方法 应按以下操作步骤实施： a) 热标记实施前，观察受精卵发育情况，记录水温； b) 当受精卵发育至发眼期阶段，按照热标记水温调控周期模式实施时间，运行水温控制设备； c) 每 6 小时测量一次水温，保证全程流水孵化； d) 标记结束后，按正常条件进行孵化、培育； e) 标记结束后 30 天内，随机选取 20 尾鱼苗，在解剖镜下取出耳石； f) 耳石经无水乙醇清洗后晾干，置于 95% 乙醇中脱脂 24 小时，转入 95% 乙醇与二甲苯等体积 混合的溶液中过度 10 分钟，之后置于二甲苯溶液中透明 30 分钟，最后用中性树胶固定在载 玻片上，于无尘干燥处晾干； g) 显微镜下检测标记效果，在封片后的载玻片上加贴标签，保存在切片盒中。 6 记录与档案 对整个标记过程进行完整记录，记录内容参见附录 B ，并建立档案，档案长期保存。 2 DB22/T 3306—2021 AA 附 录 A （资料性） 标记模式 A.1 原则 根据摩斯密码原则，设计不同字母组合作为标记。编制实施时间表。 注：摩斯密码即通过不同的排列顺序来表达不同的英文字母、数字和标点符号的一种时通时断的信 号代码。 A.2 模式 热标记水温调控周期模式，以高温标记字母，低温标记间隔的原则进行。字母内间隔为低温 12 小 时，字母间间隔为低温 36 小时。以 C H N 三个字母为例，标记模式为：( 36 H - 12 C - 12 H - 12 C - 36 H - 12 C - 12 H ) - 36 C - ( 12 H - 12 C - 12 H - 12 C - 12 H - 12 C - 12 H ) - 36 C( 36 H - 12 C - 12 H )。 其中，H 表示高温期，C 表示低温期。阿拉伯数字 12 和 36 表示持续的 时间（单位是小时）。 3 DB22/T 3306—2021 BB 附 录 B （资料性） 大麻哈鱼放流鱼苗耳石标记档案记录应符合表 B.1 要求。 表B.1 标记批次 卵粒数 大麻哈鱼放流鱼苗耳石标记档案记录样表 繁殖日期 标记日期 出膜日期 标记模式 _________________________________ 4 放流日期 编号